因PCR是一種極敏感的擴(kuò)增技術(shù)，易受污染的影響。小量的外源 DNA 污染可以與目的模板一塊被擴(kuò)增。當(dāng)前一次擴(kuò)增產(chǎn)物用來(lái)進(jìn)行新的擴(kuò)增反應(yīng)時(shí)，會(huì)發(fā)生共同來(lái)源的污染，這稱之為殘余污染；從其他樣品中純化的 DNA 或克隆的 DNA 也會(huì)是污染源。衛(wèi)生部已經(jīng)明確規(guī)定，凡是用于臨床檢驗(yàn)的PCR試劑，都應(yīng)該有 UNG酶技術(shù)，以防止污染。

詳細(xì)介紹

UNG酶

編號(hào)	規(guī)格	售價(jià)￥
ZP00501	100U	250
ZP00502	500U	1200
ZP00503	1000U	2200

相關(guān)試劑

抽提試劑盒...

反轉(zhuǎn)錄試劑盒...

dNTPs...

Taq酶...

熒光定量試劑盒...

槍頭、離心管...

UNG酶用途

控制污染的方法主要有兩種：

1 、在 PCR 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用良好的實(shí)驗(yàn)步驟和實(shí)驗(yàn)環(huán)境減少殘余污染：使用抗氣霧劑移液管的阻止氣霧劑進(jìn)入 eppendorf 管內(nèi)；為 PCR 樣品配制和擴(kuò)增后分析設(shè)計(jì)隔離的區(qū)域；在準(zhǔn)備新反應(yīng)前更換手套；總是使用不含有模板的陰性對(duì)照檢測(cè)污染；使用預(yù)先混合的反應(yīng)成分，而不是每個(gè)反應(yīng)的每個(gè)試劑單獨(dú)加入。

• 使用UDG酶），這種酶移除 DNA 中的，在PCR反應(yīng)液配制時(shí)，將dUTP和dTTP 按一定的比例混用，使得擴(kuò)增產(chǎn)物含有脫氧，這種產(chǎn)物對(duì) UNG 敏感，所有可以在PCR前對(duì)新配制的反應(yīng)用 UNG 處理以破壞殘余產(chǎn)物，杜絕污染。

UNG酶特征

• 克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表達(dá)后，再經(jīng)三次過(guò)柱純化分離出來(lái)的重組蛋白。

• 50ul 體系中，加入0.1U的UNG酶，能夠消除 10 7 帶有 dUTP 的、大于 6 個(gè)堿基的雙鏈DNA 污染。

• 反應(yīng)條件： 37℃ ，2分鐘；反應(yīng) buffer: 20mM Tris-HCl(PH:8.0); 1mM EDTA; 1mM DTT;60度以上可以滅活。

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